单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于抵抗能力种类特情人、寡核苷酸掩盖的成本高涨或进行方法缜密。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯专家教授微商团队在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个低费用、跨植物物种、全软件兼容的全新解决方案。

论文期刊详细资料

Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由国内菌物学课院隔代基因基因显性基因与健康成长菌物学探究所和国内隔代基因基因显性基因设计会主办人的国际级学术讨论性杂志，倾力于有关资料人的一生菌物学课和中医学隔代基因基因显性基因学层面的原创基地性探究结果。JGG 202四年度决定要素7.1，Scopus学术讨论性杂志点评标准CiteScore 9.9，居首JCR 202四年度GENETICS & HEREDITY层面Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY层面Q1区，居首国内菌物学课院杂志系统盘菌物学商品类别1区(Top杂志)，隔代基因基因显性基因学和什么是生化与团伙菌物学小类双1区。

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一些 是HEATag

巧设的“二三合一”定制

HEATag是由凝集素和HUH内切酶组合而成的协同球蛋白

「wifi定位器」功能模块 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化表达（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「链接器」功能模块 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）目录长形码确定共价相连接。

“1+1>2”的体验：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行范本标志与朔源。

Fig1: HEATag多个标上机制提醒图

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实战演练检验检测

HEATag无论有可以打？

会在各不相同水平下，进行母乳喂养动植物神经元系单神经元混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。实验团对为 HEATag 装置了多轮 “压强测试方法”，从神经细胞系系到神经细胞系核，从常温的到地温，从新鲜样版到固定好样版，全地方核验它的平衡性和靠得住性。

第1轮软件测试专门针对喂奶動物血生殖内部系：调查者确定了出自于人、鼠、仓鼠三种种群的两类血生殖内部（HEK293T、K562、MEF、CHO），在制冷下使用 HEATag 标上后比调测序。最终能够收售的 11447 个血生殖内部中，85.66% 都能完成 HEATag 长形码最准确相配到原种群，模板间重叠严重污染很少，UMAP 聚类探讨探讨往往会说明，HEATag 长形码与种群特男人基因组组有特点相对高度高度。 然后，检测前提状况进每一步晋级：科学研究人群成功在 4℃下标示最新受损神经元系、在室内温度下标示甲醇不变受损神经元系，可能同时标示受损神经元系核。后果早已亮眼睛：所以前提状况下，模板tag标签与植物物种个人信息均还具有特别好的涉及到的性，拆成较准率超 95%。倘若甲醇不变会引致偶尔的转录本交叠感染，受损神经元系核光催化原理会现一些 RNA 引流，受损神经元系业务类型的引用后果早已与最新模板维持同一，证明文件 HEATag 能否标示有差异 工作前提状况下的实验报告模板。

Fig2: HEATag 可在区别必备条件下顺利完成单細胞转录组混样进行分析

才可以标签母乳喂养食草软体动物和海洋环境无脊椎神经食草软体动物的原代组织细胞

比如说受损细胞核系測試是 “基础框架题”，那阻止样品可是 “额外增加题”， 这个样品总是因受损细胞核分类更复杂、坏境适应环境性特殊化，将成为标上高技术的 “薄弱点”，而 HEATag 刚好在这个 “薄弱点” 上突显了竞争优势。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸团队，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞不只是能被正确区分开，因此主要神经元种类的聚类分析法后果都明白可辨。

更令人惊喜的是HEATag对浅海生态学的适应性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 条状码与植物物种转录组兼具较高相同性性，不能导至因高盐生活环境导至的 “标记符号失灵”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可建立喂母乳植物机构样例几斤 scRNA-seq 分折

Fig4: HEATag可推动新的深海无脊梁骨小动物诸多 scRNA-seq 讲解

HEATag与上皮细胞的整合不能造成的转录组的同质性优化

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在进行图标每日任务的一同，不会轻易对随后的转录类物质析诱发干涉，有保障了深入分析资料的真正性。

Fig5: HEATag不可能关系样本量的 RNA 展现基本模式

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发展可期

HEATag 能为单血细胞探究带来了什么样的？

HEATag 的交换价值，远不绝于 “搞定标识问題”，它的协调性性和共通性，正处于为单细胞膜探析张开许多可以性

从用游戏场景看看

HEATag 能盖住从 “简便更加剖析”（如癌机构安排安排与常规机构安排安排、中药治疗与比对）到 “大总量化深入分析”（如机构安排安排肿瘤血细胞图谱画制、高通骁龙量淘汰）的全比率要求。如今 PIP-seq、Stereo-cell 等多功能可发展趋势技木的发展趋势，HEATag 还能进两步大幅提升单肿瘤血细胞深入分析的通量，四轮驱动科学公司展开大些总量化的项目流程。

从跨行业领域发展潜力你看

HEATag 不可采用于转录组学，还能与表观遗传基因组学、球膳食纤维组学、个人空间组学等技术工艺水平搭配，实现定做引索和寡核苷酸编码序列，HEATag 能够 快速渗透各种的组学程序，不导致移动信号捕捉深度.。与此同时，由于HEATag还能够 壮大单上皮细胞糖组学实验技术工艺水平。

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进行合作各式各样

拜谱动物与陈凯硕士生导师达到目标大概合伙意向但这并

指的特别关注的是，在 HEATag 系统展示出惊人选用潜质的背静下，拜谱微怪物已与东莞地区海域地理学与工程建筑东莞调查设计室（北京）陈凯专家教授获得进行合作协议意项。彼此之间筹划把握 HEATag 系统的产业发展化半空、教育科技研究开发转变成等角度刺激性层次协同，驱动这一个低投资成本、跨鱼类的单组织体体细胞图标系统迅速选用于真实教育科技研究开发场景中，为更大调查设计室给出高效率的、生活的单组织体体细胞研究分析交通工具，电子助力教育科技研究开发工做者在组织体体细胞微怪物学、海域微怪物学、疫情措施等领域赢得更大攻克