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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
糖份子自身的的复杂化性和很多的N-glycoproteins低表达出关卡更加对N-glycosylation格局的定量分析的形容最为难点。在查重低丰度的N糖基化绘制球蛋清或肽段时,之中夹杂着多未绘制的球蛋清肽断,这很更易将低丰度的糖基化绘制球蛋清肽段的数据盖住。凝素亲和法是如今糖球蛋清质组学中用途比较多泛的剥离生物富集的办法。凝集素(lectin)一类糖用球蛋清质,能专业设别某段层次性格局的单糖或聚糖中相应的糖基回文序列而与之用,植物的根与糖链可逆反应非共价用,糖球蛋清或糖肽被凝集素猎取后面,基本上用相应的单糖用激烈竞争用凝集素将糖球蛋清或糖肽洗刷完成。 蛋白酶酶质经由酶解后根据凝集素(lectin)生物富集N-糖基化肽段,而后用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中去除连入在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该办理原因具体分析Asn大原子核量增大2.9890Da。后面用高误差LC-MS质谱仪探测脱糖后的肽段,借助搜素数据显示库,核实脱糖后大原子核量与之概念大原子核量的变化规律相应糖基化淡化肽段的编码序列,进而判定该蛋白酶酶质的N-糖基化位点。N-糖基化位点判定,,再根据label-free的方式对其确定降钙素原检测具体分析。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
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