冷胁迫是不良影响农粮食作物生产量的主耍工作环境探索之五。钙依耐性血清激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）卫星信号获取到组织细胞并缴活对困境积极地响应的关键所在上下调整指数，但其调节管控机能尚不很明白。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷碱化绘制位点测量服务。

英语翻译文章标题：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

英文版小标题：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

老客户方：浙江大学

分析资料：番茄

拜谱展示 技艺：磷碱化绘制位点探测

理论研究一个构想：

一、调查报告单

1、CPK27在超低温胁迫下表达出来调涨，以此提升茎叶耐热性

既往不咎研发表示，CPK27在冷胁迫能力下表答调整。为认证该结局，本段中小说拜谱生物动用CPK27的多个敲除变动系（cpk27 #2，#6）对其进行耐低温性软件测试，察觉CPK27的转录横向偏态多于相较比较组（图1a-b）。在CPK27表答被可抑制的值物中，对耐低温性的怎强功能偏态变弱。进一点的亚細胞核位置定位与重置研发表示，冷胁迫有利于CPK27向細胞核核1个，并怎强其磷碱化横向（图1 f）。抗体痕印浅析进一点表面冷胁迫引诱 CPK27 在核内淀粉酶丰度上升、胞内丰度削减，外源CaCl₂工作可部门恢复正常cpk27的冷脆弱表型，表示CPK27依赖感Ca²⁺网络信号发挥效用功能。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺忽略方式增加番茄抗冻性

2、CPK27采用干预黄胺类转化成前提条件缓和温度过低受伤

转录组测序结局显示 ，CPK27的过表现差异性调整黄大环内酯菌物提炼图片涉及表观遗传，如CHS、CHI和FLS等，互相黄大环内酯消化吸收信号通路差异性含有。而CPK27突然变化体中此类表观遗传表现下跌，显示CPK27顺利通过利于黄大环内酯提炼图片辅助主茎排解低温制冷的效果胁迫给我们的硫化阻力（图2a-e）。

图2 RNA-seq进行分析CPK27宏观调控的冷出错DNA

3、HY5是CPK27介导的抗寒无线信号通道中的重中之重靶标

为效验 CPK27 与 HY5 的互相影响，小说作家一开始开始了酵母菌双杂交育种（Y2H）实践，最终结杲灵魂有两种有互相影响（图3a）。双分子结构荧光相容（BiFC）实践进这一步表述CPK27 与 HY5 在内部核内造成互相影响（图 3b）。随即采用免疫抗体共积累等高技术，察觉HY5与CPK27在蕨类植物体內有互相影响，且两种的互相影响具备着钙亚铁离子（Ca²⁺）信任性（图 3c）。显然，在Co-IP实践的球蛋白提炼前施用冷胁迫解决，最终结杲显现冷胁迫可怎强HY5与CPK27的互相影响（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷碱化其关键性位点

4、CPK27磷过酸HY5减弱其转录特异性，有助于黄吩噻嗪遗传基因表示

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷硝化作用遮盖位点验测，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷过酸HY5并强化其可靠性

5、CPK27 在类黄酮生态学制作而成径路中的作用于HY5的上中下游

综上dna表达方法和产生物体具体分析结果显示（图5），CPK27在冷胁迫回复整个过程中帮助于HY5的长江上游，完成调节 HY5 介导的类黄酮生物体获得通道影晌草木耐旱性。

图5 CPK27功能于HY5中下游

二、的文章工作小结

由此可见所诉，本论文探索说明CPK27磷酸性反应体现HY5蛋清，提高类黄酮提炼途经，引致抗脱色物质沉积，而使增进耐寒性功能。该探索阐述了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联管控措施（图6），证明CPK27介导的HY5磷酸性反应是连接方式钙4g信号与次生分解代谢阻碍的关键所在缓解，为解释沉水植物顺境死机微信网络带来了了新第一人称视角。

图6 CPK27-HY5接口提高了树种耐受性冷胁迫的制度化

三、拜谱工作小结

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清质组学、装饰血清质组学、细胞代谢组学、转录组学等多个学产品设备技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

学习论文：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134